|
있게 된다. -> 속도가 빠르다) 또, DNA와 물이 결합해 있을 때 Ethanol이 들어가면 DNA는 물보다 DNA를 잘 응축시키게 된다는 점을 알게 되었다. (1) 실험 제목
(2) 실험 목적
(3) 실험 내용
(4) 실험 결과 및 토의
(5) 실험에 대한 고찰
|
|
|
(Introduction)
1. 플라스미드 (Plasmid) DNA
2. Plasmid DNA 분리
3. Plasmid DNA 정제
Ⅲ. 실험재료 및 방법 (Materials & Methods)
1. 실험재료(Materials)
2. 실험 방법(Methods)
Ⅳ. 실험결과 및 결론 (Data and Results)
Ⅴ. 고찰 (Discssion)
Ⅵ. 참고 문헌 (Reforence)
|
|
|
플라스미드
-플라스미드 분리
-원심분리기
원심분리기는
-아가로스
3. 실험준비물
1)소모성 재료
2)기기
4. 실험방법
1)Plasmid mini prep kit을 이용한 정제
2)아가로스 젤 만들기
3)전기영동
3)DNA 확인
5. 실험결과
6. 고
|
|
|
실험재료(Materials)
2. 실험 방법(Methods)
Ⅳ. 실험결과 및 결론 (Data and Results)
Ⅴ. 고찰 (Discssion)
1. 제 1 타입은 세포 전체 DNA(total cell DNA)이며 클로닝될 유전자를 얻기 위해 필요.
1-1. Total cell DNA의 분리
2. 제 2 타입은 순수한 플라스미드 DNA
|
|
|
DNA가 침전되며 침전된 DNA를 적당한 완충용액에 녹임으로써 플라스미드 DNA를 정제할 수 있다.
혹은 이온 교환 크로마토 그래피 법을 이용하여 보다 순수한 plasmid DNA를 정제할 수도 있다. (Plasmid DNA 분리 &
농도 측정 &
electrophorosis
|
|
|
DNA electrophorosis
분리한 plasmid DNA를 agarose gel에서 전기를 걸어 분리하면 크기를 비교 분석 할 수 있다.
전기이동은 전기장이 걸린 한천겔(agarose gel)에서 DNA가 크기에 따라 분리되도록 하는 실험 방법이다. 전기 이동된 DNA는 ethidium bromide로 염색
|
|
|
나타나는 이유)
(3) 잘 뽑았을 경우, CCC form이 많이 뽑히고, 다른 form들은 적게 나온다. 우리 실험 결과를 보면 그렇지 않은데 어떤 원인들이 있을지 생각해 보세요.
(4) cloning이 무엇인지 그 과정은 어떻게 되는지 조사해 보자.
7.Reference
|
|
|
실험시 고려할 사항
@ 제한효소 비활성화 방법(효소파괴)
@ 전기영동
@ 표준 전기영동으로 DNA 분자를 분리할 수 없는 이유
@ 젤 전기영동에 의한 분자의 분리
@ 젤 전기영동 실험 결과를 보는 방법
@ DNA ligase 활동
@ Blunt 말단 분자
|
|
|
아닐 경우 세포 내의 고유 DNA일 가능성도 배제할 수 없다. 1.PCR
-PCR에 쓰인 재료의 역할
-PCR과정
-PCR시 고려사항
2.전기영동
-전기영동 과정
3.Ligation
-Ligation 과정
4.Transformation
5.Plasmid seperation
6.Enzyme cutting
7.최종결과
|
|
|
0 mL (MW=98.14, 29.44 g)
Glacial acetic acid 11.5 mL
DW 28.5 mL
⑤ TE buffer (100 mL)
10 mM Tris-HCl (pH 8.0) (MW=121.1, 0.3 g)
1 mM EDTA (pH 8.0) (MW=372.2, 0.04 g)
⑥ Ethanol, 70% Ethanol, Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol (각각 100 mL)
⑦ Spectrophotometer, 1.5 mL Eppendorf Tube, Microcentrifug
|
|
메뉴펼치기
