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까봐 기준보다 많은 양을 넣어서 인지 뚜렷하게 잘 나와 있었고, 크기마다 잘 분리된 결과가 나와서 뿌듯하고 좋았습니다. 1. 제목(subject):
2. 재료 및 기구(Material and Apparatus):
3. 실험방법(Methods):
4. 실험결과(Results):
5. 고찰(Discussion):
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실험목표
실험원리 및 이론
-Plasmid 란
-Plasmid 의 종류
-Plasmid 의 이용
-Plasmid DNA의 정제
-Plasmid DNA의 분리
-solution Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ 용액
실험방법
실험결과
고찰 및 토의
참고문헌
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DNA[1]
- 핵산인 DNA는 데옥시리보뉴클레오타이드라고 하는 단량체가 사슬의 형태로 연결된 중합체이다.
- 2개의 폴리뉴클레오타이드 가닥으로 이루어진 이중나선 구조의 고분자 화합물이다.
- 유전정보를 암호화하고 저장하는 역할을 한다.
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0 mL (MW=98.14, 29.44 g)
Glacial acetic acid 11.5 mL
DW 28.5 mL
⑤ TE buffer (100 mL)
10 mM Tris-HCl (pH 8.0) (MW=121.1, 0.3 g)
1 mM EDTA (pH 8.0) (MW=372.2, 0.04 g)
⑥ Ethanol, 70% Ethanol, Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol (각각 100 mL)
⑦ Spectrophotometer, 1.5 mL Eppendorf Tube, Microcentrifug
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하여 저항성을 지닌 E.coli의 plasmid의 DNA를 isolation하는 것이였다. chromosomal DNA와 plasmid DNA는 서로의 크기와 구조의 차이 때문에 분리가 가능했다. chromosomal DNA가 plasmid DNA보다 훨씬 크고, 형태도 chromosomal DNA는 linear DNA인 반면에 plasmid DNA는 closed ci
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52 X
6. 고찰
1) 원래는 plasmid와 DNA가 제대로 ligaion이 되었는지 확인하기 위해 restriction mapping을 사용하지만 지난주에 ligation한 plasmid와 DNA를 사용하지 않아서 조교님께서 주신 plasmid + DNA ligate의 restriction enzyme site를 결정하기 위해 mapping을 실시
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를 할 때 각각의 역할
1) agarose : 겔화 힘이 센 중성 다당류의 하나로 생체 물질을 분리하는 여과재로 단백질이나 효소 따위를 특이하게 고정화하는 우수한 고분자 다당류 지지체로 쓴다. 즉, 분리 능력이 우수해 저분자 DNA의 해석에 유용하다.
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분리한다.
u Buffy coat나 임파구는 최고속도를 쓰는 것이 좋다.
6. 빠져나온 용액을 버리고, 다시 설치한 다음 AW용액을 500 ml 가하고 다시 원심분리한다. 이 과정을 한번 더 반복하고 빠져나온 용액을 버린 다음, 그 상태로 다시 2분간 최고속도로
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표 1과 같다. 비특이 PCR 산물이 형성되는 경우 결합온도를 올려서 반응시켜 보면 비특이 산물을 줄이는데 도움이 되는 수가 있다.
㉢ DNA의 합성(polymerization)
70°C∼74°C에서 시행하며 원하는 PCR 산물의 크기가 크거나 반응요소의 농도가 낮을
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DNA를 분리하는 실리카 흡착법에 이용된다.
이로써 바이러스의 DNA 분리와 정제의 과정을 마쳤다. 실험 과정에서 넣어야할 buffer가 많아서 method를 잘 보면서 넣어야 할 buffer의 순서를 잘 지켜서 넣어야했다. 또한 buffer를 넣는 과정과 waste를 버
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