|
plasmid란 무엇인가?
2. 분자유전학적 관점에서의 plasmid의 용도와 그 기능을 간략히 서술하시오.
3. Plasmid 구조(형태)에 대해 서술하시오. (그림포함)
4. 자신의 DNA gel 사진을 첨부하시오.
5. Gel 사진을 보고 Uncut DNA, Vector, Insert DNA size를 계산하
|
|
|
Plasmid Mini prep & PCR & Agarose Gel Electrophoresis
3.21.~28.
Enzyme digestion & Gel extraction
4.4.
Ligation & Transformation
4.18.
Agarose gel electrophoresis & Confirm the plasmid DNA
4.25. 1. Plasmid Mini prep & PCR & Agarose Gel Electrophoresis
3.21.~28.
2. Enzyme digestion & Gel
|
|
|
DNA는 쉽게 통과하지 못해 느리게 내려간다. DNA의 supercioiled 구조는 DNA의 부피를 작게 만들기 세포생물학 실험Ⅱ
Exp.5,6 Digestion of DNA, Electrophoresis of DNA-2
1.Introduction
-1. Digestion of DNA란
-2. 제한효소를 이용한 Digestion
-3. 3가지의 제한효
|
|
|
enzyme digestion을 하되, 이 방법이 사용 불가능할 경우는 single digestion 방법을 사용하시오. enzyme 선택의 이유도 제시하시오.
4. Transformation 후, screening 과정을 거처 bacterial colony로부터 plasmid를 추출했을 때, 이 recombinant DNA가 제대로 된 insert를 가
|
|
|
enzyme)
3) DNA ligation과 T-vector를 이용한 PCR product의 cloning
Ⅲ. 유전자가 삽입된 DNA를 세포 내로 주입
1) Transformation
2) 항생제와 LacZ를 이용한 seletion
※ 항생제를 이용한 selection
LacZ를 이용한 color selection
Ⅳ. 올바른 clone 선택
1) Plasmid DNA
|
|
 |
기본 원리
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p748 Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
Discussion
|
|
|
DNA 분리특성」, 한국식 품과학회지 Vol.31, No.1, 도정룡, 오세육저, 한국식품과학회, 1999, p110-114.
-http://kin.naver.com/db/detail.php?d1id=11&dir_id=110205&eid=hRLCh+1aFbi3Sk8wm 5HOWnbPLZGgytYq&qb=RE5BwMcgwaS3riDD+MGk
-http://blog.naver.com/reframan?Redirect=Log&logNo=40029466494
-http://www
|
|
|
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
1㎕
5\' primer
1㎕
3\' primer
1㎕
DW
17㎕
total
20㎕
< R E F E R E N C E >
1) Gene cloning and DNA analysis An Introduction, T.A.Brown, Fourth Edi
|
|
메뉴펼치기
