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1. 운반체로서의 plasmid란 무엇인가?
2. 분자유전학적 관점에서의 plasmid의 용도와 그 기능을 간략히 서술하시오.
3. Plasmid 구조(형태)에 대해 서술하시오. (그림포함)
4. 자신의 DNA gel 사진을 첨부하시오.
5. Gel 사진을 보고 Uncut DNA, Vector, I
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site를 정하고 design 하시오.
7. 만약에 cloning은 정상적으로 되었는데 단백질 추출이 되지 않았을 경우, bacterial cell 내에서 무슨 일이 일어났을지 가설 설정과 원인을 밝혀낼 수 있는 방법 및 이 문제를 해결하기 위한 대안을 제시해 보시오.
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Plasmid DNA의 추출과 Restriction enzyme에 대한 결과를 동시에 확인할 수 있는 실험이었습니다. 1. 완충액(Buffer)의 조제 (0.05M 구연산 완충액)
2. BRADFORD 시약을 이용한 단백질 정량
3. Plasmid purification by spin column (Miniprep)
4. Plasmid DNA digestion by R
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공식 학술카페) - Plasmid prep
- [네이버 지식백과] 플라스미드 [Plasmid] (분자·세포생물학백과)
- 김명원 외 9명, 생명과학 개념과 현상의 이해, PEARSON, 186page, 210~212page 1. 실험 목적
2. 바탕 이론
3. 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 참고 문헌
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DNA 정량 분석 및 정성 분석의 중요성
- 정제를 하는 이유는 잘린 것에 효소, 잘린 조각 등 불순물이 많기 때문에 필요한 DNA만 쓰고 측정하기 위해서 한다. 또한 제한효소 처리를 해서 Plasmid DNA와 Insert DNA를 자를 때 정제를 하지 않으면 잘 잘리
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Watson, Molecular biology of the gene, Pearson Benjamin Cummings, Cold
Spring Harbor Laboratory Press.
- [네이버 지식백과] 플라스미드 (분자,세포생물학백과)
제한효소 (두산백과) 1. 실험 목적
2. 바탕 이론
3. 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 참고 문헌
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DNA의 변성(denaturation)
② Primer의 결합(annealing)
③ DNA의 합성(polymerization)
4) PCR의 산물의 전기영동(electrophoresis)
PCR product purification
Ⅱ. 얻은 유전자를 vector에 삽입
1) Vector
※ Vector의 기능
※ Vector의 종류
2) Restriction enzyme
※ Recombinant D
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전기영동용 gel을 만들어 핵산의 분리 및 확인 등에 사용한다. 아가로즈의 분자구조는 galactose and 3,6-anhydrogalactose의 중합체로 되어 있으며, gel 화 하였을 때 전기적으로 중성인 망상구조를 가진다. 이 망상구조의 특성을 이용하여 주로 DNA나 RNA
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digestion
Electrophoresis (전기영동)
Electroporation (전기천공법)
End-filling
Endonuclease
Episome
Ethanol precipitation (에탄올 침전법)
Ethidium bromid (EtBr)
Exonuclease (핵산말단가수분해효소)
Expression Vector
Fermenter
Field inversion gel electrophoresis(FIGE)
Fluore
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plasmid isolation(Ammonium acetate 법
2. DNA Restriction (Vector 제작
3. pS44 DNA restriction
4. Electrophoresis
5. PCR (polymerase chain reaction
6. Elution ;Gene clean kitⅢ(Bio101
7. Ligation
8. Competent cell 제조 (DH5α) - CaCl2 법 사용
9. Transformation (Heat shock
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