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Enzyme
(EcoR Ⅰ, Nde Ⅰ, Xho Ⅰ)
Fig 11 . H buffer
- Tris-HCl (pH 7.5) 500mM,
MgCl2 100mM, NaCl 1000mM,
DDT(Dithiothreitol) 10mM 로 구성되었으며, 제한효소의 활성을 최대화하기 위해 pH를 조절해주는 용액이다.
Fig 12. 제한효소의 기능
- 제한효소는 DNA의 특정한 염기의
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gel에 DNA marker 3ul과 ⑧번 솔루션 5ul을 각각 well에 넣어준다.
⑪전기영동기를 스위치를 누른 후 gel의 2/3정도에 bromophenol blue가 오면 멈추고 겔을 uv-transilluminator로 관찰한다. a. 실험 제목
b. 실험 목적
c. 이론
d. 실험 도구
e. 실험 방법
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DNA를 다시 붙이는 Ligation of DNA를 할 예정이다. 생물의 가장 기본 구조인 DNA를 잘랐다 붙였다 할 수 있는 것을 보면 새삼스레 신기하다는 것을 느낀다. 예비
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DNA염색시약이 아니라 얼마나 gel이 이동했는지 가시적으로 보여주는 역할을 한다.
참고문헌
화공생물공학과, 단위조작실험책, P71~76
네이버 지식사전, 두산백과, 제한효소
네이버, 생명과학대사전, 겔전기영동
생물나라, https://www.biozoa.co.kr , D
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DNA와 linear DNA
대부분의 plasmid는 세포내에서 supercoiled circular DNA로 존재하며 이러한 supercoiling은 plasmid replication 과정 중에 topoisomerase에 의해 수행되어진다. plasmid DNA 가닥에 손상된 곳이 없을 때 covalently closed-circular(CCC) DNA를 형성하며 반대로 두
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