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분리된다.
Stacking gel은 acrylamide 농도가 3~5%인 것을 사용하며 pH는 6.8이다. Running gel (resolving gel 또는 separating gel)은, 분리하고자 하는 단백질의크기에 따라 6~15%를 주로 사용하며 pH는 8.8이다 .
5. Reference
1. http://www.elpisbio.com/sub/support/protocols/SDS-PAGE
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SDS-PAGE를 사용하는 것일까? 기본원리는 cell extracts로부터 특정 protein을 detection하기 위해서 먼저 gel electrophoresis를 이용하여 size 별로 분리해 낸다. 이 과정에서 protein을 순수하게 size별로 분리해내기 위해서, protein을 단위 질량당 charge와 단백질
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Stacking gel
Stacking gel 상에서 Cl-와 glycine간의 이동속도 차이는 두 이온 사이에서 발생하는 high voltage gradient의 영향을 받음
이 두 이온 사이의 전기장이 또 한번 생김으로 두 이온 사이에 놓인 단백질들은 분자량의 차이에 의한 이동속도의 차이
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단백질 부분)을 제외한 그 외 Gel에 염색된 부분을 탈색시켜준다.
- Destaining solution을 Gel이 잠길 정도로 부어준다.(그릇 표면에 Gel이 붙어있을 경우 흔들어 띄어준다.)
- plate mixer로 교반 시켜준다.
- 교반 중간 중간 마다 Destaining solution을 갈아
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단백질과 DNA의 정량
A. 단백질의 정량
1) Bradford assay
2) Lowry method
B. DNA의 정량과 순도 측정
2. 단백질과 DNA의 정량
A. SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동과 분자량 측정
B. Agarose gel을 이용한 DNA의 전기영동
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6.2 단백질(Proteins) ------------------------------- 34
6.3 핵 산 --------------------------------------- 39
Ⅲ. Chitosan을 혼입한 spange제조 실험 ------------------ 45
Ⅳ. 결 론 ------------------------------------------47
Ⅴ. 참고 문헌 -------------------------------------49
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단백질(50%)을 구해냈고 나아가 α-Amylase(8.7%)의 조성비율까지 찾아냈다. 따라서 Eq. 2는 각각 α-Amylase(8.7%), CPs(41.3%), cell debris(49%), DNA(1%) 임을 구하였다. DNA-PEI complex를 효율적으로 제거 하기 위하여 원심분리를 한다. 1 서론 /6
1.1 α-Amylase
1.2
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분리한 bacillus subtilis sw-1의 항암활성, journal of life science, 14(5), 815～820(2004)
6.김관필,이창호,우철주,박희동:bacillus megaterium SFO41에 의한 cholesterol oxidase의 생산 및 최적배양조건, 한국식품영양과학학회지, 30(3), 403～409(2003)
7.최무영: 혈전분해효소
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단백질로 설정하여 primer design을 진행하였고, pcr 및 SLIC method를 활용한 뒤에 transformation과 IPTG 처리를 배웠습니다. 그 후 Ni-NTA colum 실험과 SDS-PAGE 후 TagX 단백질의 크기를 비교하여 발현 온도에 따른 binding affinity를 비교하는 연구에 참여하여 실
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