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chromatography를 행할 경우 silica gel의 양, 전개용매, 유속이 중요하다.Column에 충진하는 silica gel의 양과 시료 량과의 관계: 보통의 경우 silica gel의 양은 시료양의 20~30배, 불순물이 적게 함유된 목적물질을 단리 하는 경우 15~20배, 대량의 시료를 크
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시료들을 더 가지고 주요 닭간을 이용한 이온교환 크래마토그래피를 할 시에 추가적으로 실험해 보고 Rf결과를 관찰해 보았더라면 더 좋은 비교실험이 되지 않았을까 생각해 본다.
◇참고문헌
-실험 생화학, 탐구당, 한국생화학회, 1982
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원하는 밴드 외에 나타난 다른 단백질의 밴드를 없애기 위해 바꿔줘야 할 condition은 무엇일까?
Q2) Affinity chromatography 중에서
Ni-NTA vs. GST(glutathione S-transferase) →elution 원리의 차이
Q3) SDS-PAGE에서 APS, TEMED, sampling buffer조성
5.Reference
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→ data 열기 → report → 파일 미리보기 → 인쇄
실험이 끝난 후, flow rate를 반대로 순차적으로 낮추면서 이동상을 20분간 흘려줌
기기 끄기, syringer washing, 주변정리 1. 실험목적
2. 실험원리
3. 시약 및 기구
4. 실험방법
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크로마토그래피 상에서 각 단백질의 상대적 이동은 정지상과의 결합 능력에 달려 있다. 흔히 사용하는 3가지 크로마토그래피는 겔 여과 크로마토그래피(gel-filtration chromatography), 이온 교환 크로마토그래피(ion-exchange chromatography)와 친화 크로마
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크로마토그래피(gel-filtration chromatography)
① 크기와 모양에 따라 분리
② 분자량이 작을수록 이동속도는 느림
2) 이온-교환 크로마토그래피(ion-exchange chromatography)
① 전하에 따라 분리
② 음이온 또는 양이온 교환수지 이용
3) 친화성 크로마토그
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ion을 넣어주어 결합을 끊기 위해 농도가 다른 NaCl solution을 50mM→100mM→150mM→200mM순으로 두 번 에 나누어 넣어준다. 농도를 달리 하는 것은 결합세기에 차이를 두는 것이고, 두 번에 나누어 넣어주는 것은 속도요인을 고려한 것이다. 저농도에
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이온교환수지
크로마토그래피
(슬라이드 노트 설명 첨부)
추출 (Extraction)
불순물이 들어있는 혼합물로부터 어떤 물질을 적당한 용매를 써서 용해시켜 원하는 물질을 얻어내는 방법
고체에서 액체로 추출해 내는 방법
ex) 에테르를 이
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이온교환셀룰로오스 등이 쓰인다. 이 방법은 종이크로마토그래피에 비해 전개 시간이 짧고(30~60분), 분리능률이 양호하며, 강한 산 ·강한 염기나 강렬한 시약 등을 발색시약(發色試藥)으로 사용할 수 있는 특징을 지니고 있다. 유기화합물의
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있다.
2) 고속액체크로마토그래피(HPLC)
양이온교환수지와 형광법을 조화시켜 에피네프린과 노르에피네프린을 분별 정량한다.
감도, 특이성이 어느 것 보다도 우수하다. 시료의 전 처리를 필요로 한다.
3) 정상치 : 요 중 카테콜아민 : 100μg/day
9.
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