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plasmid DNA를 전기영동하고, UV를 비춰 찍은 사진이다. 중간에 선명하게 하나의 band로 나타난 것은 대조군으로 쓰기위한 standard marker이고, 주변의 분명치 않은 부분은 보는 바와 같이 어떠한 이유에서인지는 모르겠지만 전기영동이 전혀 이루어
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dry시킨다.
ⅹ) Pellet을 TE(pH 8.0) with RNase(final 20μg/ml) 50μl에 녹인 후 37℃에서 30분간 incubation한 후 -20℃에 보관한다.
☞ 분리된 DNA의 정량
ⅰ) UV spectrophotometer를 10분 정도 미리 켜두어 발생되는 자외선을 안정화 시킨다.
ⅱ) 실험에서 얻은 DNA 용
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r 4 (10x)
2㎕
Mini-prep한 plasmid
10㎕
D.W
7㎕
Nde I
0.5㎕
Nco I
0.5㎕
2.1% agarose gel에서 전기영동하여 mini-prep한 plasmid의 size가 정확한지 확인한다.
(이 때, loading dye가 들어있지 않기 때문에, 반드시 DNA loading dye(6x)를 첨가한 후에, gel에 loading한다.)
※실험
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Plasmid Mini prep & PCR & Agarose Gel Electrophoresis
3.21.~28.
Enzyme digestion & Gel extraction
4.4.
Ligation & Transformation
4.18.
Agarose gel electrophoresis & Confirm the plasmid DNA
4.25. 1. Plasmid Mini prep & PCR & Agarose Gel Electrophoresis
3.21.~28.
2. Enzyme digestion & Gel
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Plasmid DNA 분리와 전기영동
<그림4. 전기영동 결과>
전기영동 결과 4kb DNA가 검출되었다.
Ⅳ. 논의
플라스미드 DNA는 박테리아와 일부 균에 존재하는 염색체 이외의 DNA 로 ‘작고 스스로 복제하는 두 가닥의 환형의 DNA’라 정의할 수 있다. 플
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